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單克隆抗體的制備與應(yīng)用
  • 發(fā)布日期:2023-05-23      瀏覽次數(shù):1302
    • 概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
      特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。

      一、單抗的制備過(guò)程:
      1.動(dòng)物免疫:注射特定抗原蛋白
      2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
      3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
      4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌ling (H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
      5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
      6.單克隆抗體的制備和凍存、純化。

      二、單克隆抗體的應(yīng)用:
      1、診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
      2、藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)"
      3、分離和純化抗原分子。

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