抗體elisa檢測(cè)試劑盒主要用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體。是ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。
采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，各種種屬elisa試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
一、儲(chǔ)存與運(yùn)輸注意事項(xiàng)
整套試劑盒運(yùn)輸全程冷鏈2～8℃，禁止暴曬、高溫運(yùn)輸；到貨后立即轉(zhuǎn)入冰箱冷藏，嚴(yán)禁室溫長(zhǎng)時(shí)間放置。
未開封試劑盒2～8℃避光保存；HRP酶結(jié)合物、TMB底物嚴(yán)禁冷凍結(jié)冰，結(jié)冰會(huì)導(dǎo)致酶蛋白不可逆失活，顯色極弱或無顯色。
凍干標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶后必須分裝小管-20℃凍存，反復(fù)凍融不超過3次，多次凍融蛋白降解，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性變差。
拆開鋁箔袋剩余酶標(biāo)板，必須放入新干燥劑、封口扎緊，裸露存放會(huì)造成包被抗體受潮脫落，背景值異常升高。
所有液體試劑擰緊瓶蓋存放，防止揮發(fā)、氧化、細(xì)菌污染；不同批號(hào)試劑盒試劑嚴(yán)禁混用。
試劑盒不可與強(qiáng)酸、有機(jī)溶劑、消毒劑同冰箱存放，揮發(fā)性氣體會(huì)破壞抗原抗體活性。
二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備注意事項(xiàng)
所有試劑提前從冰箱取出，室溫平衡20～30分鐘再開蓋，避免瓶?jī)?nèi)冷凝水稀釋試劑濃度，造成結(jié)果偏差。
濃縮洗滌液低溫出現(xiàn)鹽結(jié)晶屬于正常，37℃水浴加熱至完q溶解、混勻后再稀釋使用；出現(xiàn)絮狀渾濁直接丟棄。
配制工作液（酶結(jié)合物工作液、樣本稀釋液）現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋后的酶工作液不可長(zhǎng)期冷藏留存，72小時(shí)內(nèi)用完。
樣本處理規(guī)范：血清、血漿避免溶血、高脂、黃疸樣本；渾濁樣本建議離心取上清，雜質(zhì)會(huì)造成非特異性吸附，背景偏高；樣本短期2～8℃存放，長(zhǎng)期-20℃凍存，避免反復(fù)凍融。
提前規(guī)劃孔位，設(shè)置空白孔、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)品梯度，不可省略對(duì)照，否則無法判斷實(shí)驗(yàn)是否有效。
移液槍提前校準(zhǔn)，配套一次性無菌槍頭，每換一種液體必須更換槍頭，杜絕交叉污染。
實(shí)驗(yàn)臺(tái)面保持潔凈干燥，避免洗滌劑、酒精濺入酶標(biāo)孔。
三、加樣操作關(guān)鍵注意事項(xiàng)
加樣時(shí)槍頭貼孔壁緩慢加注，不要直沖孔底，防止產(chǎn)生氣泡；氣泡會(huì)阻斷抗原抗體結(jié)合，讀數(shù)偏低。
標(biāo)準(zhǔn)品、樣本、酶結(jié)合物加樣順序統(tǒng)一，加樣全程控制在10分鐘內(nèi)完成，減少孔間孵育時(shí)間差，保證重復(fù)性。
避免液體加到孔壁上方、孔外，殘留液體干燥后會(huì)引發(fā)邊緣效應(yīng)，周邊孔數(shù)值偏高。
不要產(chǎn)生交叉濺液，加樣完成輕拍板側(cè)去除氣泡，不可劇烈震蕩酶標(biāo)板。
四、孵育過程注意事項(xiàng)
孵育溫度嚴(yán)格按照說明書（多為37℃），水浴孵育需用濕盒，孔板加蓋封板膜，防止液體蒸發(fā)濃縮，蒸發(fā)會(huì)大幅抬高背景。
封板膜一次性使用，不可重復(fù)復(fù)用；孵育時(shí)保證膜完q貼緊，無漏氣縫隙。
孵育時(shí)間精準(zhǔn)把控，超時(shí)孵育會(huì)非特異性結(jié)合加重，背景升高；時(shí)間不足則顯色偏低，靈敏度下降。
孵育環(huán)境避光，TMB底物遇光易氧化，顯色步驟全程減少光照。
五、洗板核心注意事項(xiàng)（決定低背景關(guān)鍵）
洗板是ELISA最容易出錯(cuò)步驟，洗板次數(shù)、浸泡時(shí)間嚴(yán)格遵循說明書，少洗會(huì)殘留未結(jié)合雜蛋白，背景飆升。
每孔加滿洗滌液，浸泡30秒后拍干；拍干用干凈吸水紙，每洗一次更換吸水區(qū)域，避免孔間殘留液體交叉污染。
洗板機(jī)洗板需檢查管路無堵塞，洗滌液稀釋比例準(zhǔn)確；手工洗板力度均勻，不可用力甩干導(dǎo)致孔內(nèi)液體交叉串孔。
洗板后孔內(nèi)不可殘留洗滌液，殘留稀釋后續(xù)顯色體系，OD值整體偏低。
六、TMB顯色與終止判讀注意事項(xiàng)
TMB底物液避光操作，A、B液等量混勻后立即使用，配制好的底物工作液不可久放，見藍(lán)即失效。
顯色時(shí)間統(tǒng)一，避光恒溫孵育，肉眼可見梯度藍(lán)色即可終止；各孔顯色時(shí)長(zhǎng)保持一致，不要單孔提前終止。
終止液為稀硫酸強(qiáng)酸，加液順序和底物添加順序保持一致，防止先加終止液的孔反應(yīng)提前停止，梯度紊亂。
終止后10分鐘內(nèi)完成酶標(biāo)儀讀數(shù)，放置過久顏色會(huì)發(fā)生變化，OD值漂移。
酶標(biāo)儀提前預(yù)熱，設(shè)置對(duì)應(yīng)檢測(cè)波長(zhǎng)（450nm，部分配套630nm參比波長(zhǎng)），空白孔調(diào)零后再讀取數(shù)值。
七、實(shí)驗(yàn)污染與交叉污染防控
陽性樣本、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品最后加樣，防止濺液污染陰性孔、空白孔。
廢液?jiǎn)为?dú)收集，不可倒回試劑瓶；槍頭一次性使用，禁止反復(fù)吸打試劑瓶?jī)?nèi)液體。
實(shí)驗(yàn)完畢酶標(biāo)板不可重復(fù)使用，包被孔內(nèi)抗原抗體結(jié)合不可逆，復(fù)用完q失效。
手套、口罩全程佩戴，手上油脂、皮屑接觸孔板會(huì)造成非特異性吸附。
八、安全操作注意事項(xiàng)
終止液含硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、眼睛；若不慎接觸，大量流動(dòng)清水持續(xù)沖洗10分鐘，必要時(shí)就醫(yī)。
試劑盒含生物蛋白原料，有潛在致敏性，皮膚破損避免直接接觸試劑。
實(shí)驗(yàn)廢液、廢棄板條屬于生物實(shí)驗(yàn)廢棄物，不可直接倒入下水道，按實(shí)驗(yàn)室生物垃圾規(guī)范滅菌處理。
避免底物、酶結(jié)合物接觸金屬容器，金屬離子會(huì)催化TMB提前氧化。
九、試劑失效判定與禁用情況
出現(xiàn)以下情況試劑盒不可使用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效：
HRP酶結(jié)合物渾濁、出現(xiàn)沉淀；TMB底物提前變藍(lán)；
復(fù)溶標(biāo)準(zhǔn)品分層、渾濁、有異味；
洗滌液大量絮狀沉淀；
未孵育僅加底物就明顯顯色；
陽性對(duì)照OD值極低、陰性對(duì)照數(shù)值接近陽性，無明顯梯度區(qū)分。
