公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

-MAP4(Ser941)： 0酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒 PP  大鼠蛋酸酶 96T

membrane glycoprotein E(VZV)： 人水痘帶狀皰疹病毒gE蛋白抗體 雜交瘤(B類);C3110D2E11

RL1(大鼠肺成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 JAR(胚絨毛癌細(xì)胞) 大鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒 TrxR  大鼠硫氧還蛋白還原酶 96T

MAGEG1： 黑色素瘤相關(guān)抗原G1/肝癌相關(guān)蛋白4抗體 人黑色素瘤細(xì)胞;A875

IKK Alpha + IKK beta： KB抑制蛋白激酶α/β抗體 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;ERA-2

QGY-7701(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA 試劑盒 NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6) 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6(多肽) 0.5mg

Interferon alpha 11： 干擾素α11抗體 人角質(zhì)細(xì)胞HHFK

XCL1 Protein Human 重組人 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 NIT2 (nitrilase family, member 2) NIT2蛋白抗原 0.5mg

IFNA10： 干擾素α10抗體 Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MCF-7人乳腺癌細(xì)胞CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠成纖維生長(zhǎng)因子受體底物2(FRS2)ELISA試劑盒 FA(Human Folic acid)  人 96T

RBMY1A1： RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白1抗體 GZMB Others Human 人 Granzyme B / GZMB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人滑膜細(xì)胞總RNAHS NA 大鼠成肌分化蛋白(MyoD)ELISA試劑盒 ET(Human endotoxin)  人內(nèi)毒素 96T

RNA polymerase III： RNA聚合酶III抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SI3)ELISA試劑盒 PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma)  人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ 96T