公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

n-Myc： 致癌基因n-Myc抗體 CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0321BEL-7405(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 CTGF(Human connective tissue growth factor)  人結(jié)締組織生長因子 96T

MRP3： 多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2

NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1(小鼠脂肪細胞) 大鼠細胞凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)ELISA試劑盒 IL-7(Mouse Interleukin-7)  小鼠白介素7 96T

MTERF1： 線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

HDAC5： 組蛋白去乙?；?span>5抗體 非洲綠猴腎細胞;CV-1 人二倍體胚肺細胞，WI-38細胞 SHG-44(膠質(zhì)瘤細胞)

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原 0.5mg

H5N1 Hemagglutinin： A型流感病毒H5N1凝集素 1ml

Rhesus antibody Rh CCL13/MCP-4 單核細胞趨化蛋白4抗體 CM-R119大鼠晶狀體上皮細胞培養(yǎng)基100mL

WISH細胞，人羊膜細胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA 試劑盒 IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽) 0.5mg

Jeko-1人套細胞淋巴瘤細胞Classical swine fever virus, CSFV： 病毒抗體 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu

正常細胞 大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)ELISA試劑盒 PGF(Human Prostaglandin F)  人前列腺素F 96T

EMC1： 腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體 IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人細胞裂解液 (陽性對照)

人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC 大鼠蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA試劑盒 PGE1(Human Prostaglandin E1)  人前列腺素E 96T

PPM2C： 蛋酸酶2C抗體 猴腎細胞;Vero IgCD4