公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠氣管上皮細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II )  小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96T

MSH2： 錯配修復(fù)蛋白2抗體 BEL-7402細胞，肝癌細胞 人口腔表皮樣癌細胞,KB細胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2

EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 CaN  大鼠鈣調(diào)0酸酶 96T

5 MethylCytosine： 5甲基胞嘧啶抗體 人脊髓星形膠質(zhì)細胞總RNAHA-sp NA

NIH/3T3小鼠胚胎細胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清) 大鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 IFN- Alpha(Human Interferon Alpha)  人α干擾素 96T

CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽) 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

HIP1： 亨廷頓(舞蹈癥)相互作用蛋白1抗體 PDK4 Others Mouse 小鼠 PDK4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人外周血白細胞培養(yǎng)基 100mL 人的幽門螺桿菌IgG(HP IgG)ELISA試劑盒 H2AX peptide 組蛋白H2AX多肽抗原 0.5mg

HAO1： 葡萄糖氧化酶1抗體 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6 羊膜細胞，WISH細胞 786-O [786-0](腎透明細胞腺癌細胞)

CD83 Others Rat 大鼠 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) 人的神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原 0.5mg

huh-7人肝癌細胞PROSAAS： 枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶1抑制劑抗體 CGREF1 Others Human 人 CGREF1 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H157 人非小細胞肺腺癌細胞 大鼠頂體蛋白(ACR)ELISA試劑盒 16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1)  人16α羥基雌酮1 96T

PROSAAS： 枯草溶菌素轉(zhuǎn)化酶1抑制劑抗體 MCF7細胞，人癌細胞 人導(dǎo)管癌細胞,HCC38細胞 髓核細胞生長添加物NPCGS

KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠丁酰酯酶(BCHE)ELISA試劑盒 CNTF  大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T

PPP2R5C： 蛋白質(zhì)0酸酶2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體 非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2